人體血液中一氧化碳的分析——定量分析4
二、氯化鈀法
原理——碳氧血紅蛋白與酸作用,釋放出CO氣體,它能定量地與氯化鈀作用。然后用紫外分光光度法測(cè)定反應(yīng)后氯化鈀溶液的濃度,從剩余氯化鈀的量可求碳氧血紅蛋白的飽和率。
操作——
1. 取擴(kuò)散吸收池一個(gè),在內(nèi)槽中精確加入 3.0mL C(PdCl2 = 0.0025)mol/L溶液,在外槽一側(cè)加1.0mL C(H2SO4=1.8)mol/L溶液
2. 取檢材血0.5mL置外槽另一側(cè),立即蓋嚴(yán)蓋子,輕輕旋轉(zhuǎn)傾斜使硫酸與血混合,如室溫<5℃需水浴上稍加熱,放置1~2小時(shí)
3. 取出內(nèi)槽中的氯化鈀溶液,過濾,濾液轉(zhuǎn)入50mL容量瓶中,用0.1mol/L鹽酸洗滌內(nèi)槽三次,洗液濾入容量瓶中,然后用0.1mol/L鹽酸稀釋至刻度,混勻后放置待測(cè)。
4. 取容量瓶中的清液置石英杯中,以0.1mol/L鹽酸作參比, 278nm處測(cè)紫外吸收。
5. 分別精確吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0mL( PdCl2 =0.025)mol/L溶液置50mL容量瓶中,用用0.1mol/L鹽酸稀釋至刻度,同上平行操作分別測(cè)紫外吸收,得到氯化鈀的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
計(jì)算——將檢血的氯化鈀吸收值與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈀溶液的吸收值作比較,求出剩余氯化鈀容量,再求出相應(yīng)的CO容量(見相關(guān)值表),然后根據(jù)檢材血的血紅蛋白含量計(jì)算碳氧血紅蛋白飽和率。
氯化鈀與一氧化碳相關(guān)值表
剩余 PdCl2(ml/50ml) CO(ml/100ml)
碳氧血紅蛋白計(jì)算公式如下:
HbCO% = CO容量(ml/100ml)×100 ÷ 血紅蛋白(g/100ml)×1.35
注意——1. 此法對(duì)新鮮檢材血可不考慮干擾問題,如是腐敗檢材血,可用醋酸鉛-醋酸
溶液代替1.8mol/L硫酸溶液,以除去硫化物的干擾。
2. 醋酸鉛-醋酸溶液配制,取10mL冰醋酸用水稀釋至100mL ,加醋酸鉛至飽
和。
3. 為保證檢材血和標(biāo)準(zhǔn)系列血中的血紅蛋白的濃度一致,平均校正因子為
1.35